Projetos

Projeto BISCAMP

2022-06-22

 


Projeto

Acrónimo: BISCAMP
Título: Soluções Biotecnológicas Inovadoras para o Controlo da Campilobacteriose Genital Bovina
Código: PTDC/CVT-CVT/30145/2017 / LISBOA-01-0145-FEDER-030145
Programa Operacional: Programa Operacional Regional de Lisboa
Objetivo Temático: Reforçar a investigação, o desenvolvimento tecnológico e a inovação
Entidade Beneficiária: Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade de Lisboa
Elementos nucleares da equipa de investigação: Elisabete Silva (PI); Luís Lopes-da-Costa (Co-PI)
Data de aprovação: 16-04-2018
Data de início:  01-06-2018
Data de conclusão: 31-05-2022
Investimento Elegível: 233.923,10€ (OE- 140.353,86€)
Apoio financeiro da União Europeia: FEDER- 93.569,24€

 

Apresentação / Objetivos

Palavras-chave:

Diagnóstico molecular / Epidemiologia / Vacina

Apresentação:

Este projeto aborda soluções biotecnológicas inovadoras para o controlo da Campilobacteriose Genital Bovina (CGB). A CGB é uma doença venérea causada pela bactéria Campylobacter fetus subsp. venerealis (Cfv), sendo responsável pela redução da eficiência reprodutiva e rentabilidade de explorações de bovinos de carne e de engorda. A CGB é uma doença com distribuição mundial, com elevado impato socioeconómico e de declaração obrigatória ao Office International des Epizooties. Os touros são portadores assintomáticos, abrigando Cfv nas criptas prepuciais, e infetam as fêmeas durante a reprodução. Nas fêmeas, a infeção por Cfv induz endometrite, morte embrionária precoce e aborto. O diagnóstico correto da CGB é crucial para a implementação de programas de controlo de doenças e comércio internacional de touros e sémen. Contudo, o diagnóstico do CGB é dificultado pelas duas subespécies de Campylobacter fetus associadas à espécie bovina, C. fetus subsp. fetus (Cff) e Cfv, com características genotípicas e fenotípicas semelhantes. O método recomendado pela OIE para o diagnóstico CGB é o isolamento microbiológico de C. fetus, seguido da identificação fenotípica de Cfv (incluindo o teste de tolerância à glicina a 1%, para o qual Cfv é intolerante e Cff é tolerante). Devido ao crescimento fastidioso de Cfv e ao potencial crescimento excessivo de outros microrganismos, as técnicas microbiológicas são trabalhosas, morosas e associadas a uma fraca sensibilidade. Além disso, Cfv pode adquirir tolerância à glicina através de mecanismos de mutação ou de transdução, sendo incorretamente identificado como Cff. Desta forma, as técnicas de biologia molecular evoluíram como ferramentas atrativas para o diagnóstico do CGB.

O controlo da CGB baseia-se no refugo dos animais infetados e/ou vacinação, uma vez que o tratamento é geralmente ineficaz, economicamente dispendioso e impraticável. Atualmente, não existe vacina contra CGB com registo Europeu, tendo sido detetadas inconsistências no que se refere ao nível de proteção conferido por estirpes de Cfv isoladas em diferentes regiões geográficas. Os mecanismos patogénicos da CGB são também amplamente desconhecidos.

Objetivos gerais:

O projeto centra-se no estudo dos aspetos pouco explorados/controversos da CGB, enquadrados em três objetivos principais:

  • Elucidação dos aspetos relacionados com a epidemiologia e patogénese da CGB (Atividade 1)
  • Desenvolvimento de um método de diagnóstico molecular para a deteção específica e sensível de Cfv (Atividade 2)
  • Desenvolvimento de estratégias de vacinação (Atividade 3 e 4)


Resultados

Publicações e outras ações de divulgação públicas de disseminação dos resultados do projeto

Artigos em revistas internacionais:

Silva, M. F., Pereira, A. L., Fraqueza, M. J., Pereira, G., Mateus, L., Lopes-da-Costa, L., & Silva, E. (2021). Genomic and Phenotypic Characterization of Campylobacter fetus subsp. venerealis Strains. Microorganisms, 9(2), 340 - URL: (Atividade 1)
 

Silva, M. F., Duarte, A., Pereira, G., Mateus, L., Lopes-da-Costa, L., & Silva, E. (2020). Assessment of Campylobacter fetus subsp. venerealis molecular diagnosis using clinical samples of bulls. BMC veterinary research16(1), 410. URL: (Atividade 2)

Silva, M. F., Pereira, G., Carneiro, C., Hemphill, A., Mateus, L., Lopes-da-Costa, L., & Silva, E. (2020). Campylobacter portucalensis sp. nov., a new species of Campylobacter isolated from the preputial mucosa of bulls. PloS one15(1), e0227500. URL: (Atividade 2

 

Deposição de genomas em bases de dados:

Os resultados da sequenciação do genoma dos isolados de Cfv foram depositados no repositório público de sequências - DDBJ/ENA/GenBank (Atividade 1).

Os resultados da sequenciação do genoma de Campylobacter portucalensis foram depositados no repositório público de sequências DDBJ/ENA/GenBanK (Atividade 2).

 

Deposição em bases de dados de novas Sequências Tipo (ST) encontradas nos isolados de Cfv:

Base PubMLST- Public databases for molecular typing and microbial genome diversity:
URLs: ST-71 ST-72  ST-73

Resultados a disponibilizar brevemente (em fase de publicação) – 3 manuscritos relacionados com as Atividades 2 e 4.

 

Teses

Tese de doutoramento

Silva, MFS 2021. Bovine genital campylobacteriosis: new insights into the molecular diagnosis and pathogenesis (.Pdf) [thesis]. Lisboa: FMV-Universidade de Lisboa.

 

Outras ações públicas de divulgação

Apresentações em congressos internacionais

Silva M F, Pereira G, Mateus L, Lopes-da-Costa L, Silva E. Molecular characterization of the preputial microbiome in bulls (Bos taurus)". Comunicação em painel apresentada no CongressMicrobiotec 19 - Congress of Microbiology and Biotechnology, 5-7 dezembro, 2019, Coimbra, Portugal. Página 258 do livro de resumos.

Silva M F, Pereira G, Duarte A, Mateus L, Lopes-da-Costa L, Silva E. Evaluation of molecular diagnostic methods for detection of Campylobacter fetus subsp. venerealis in bovine preputial samples. Comunicação em painel e oral apresentada no Congresso Internacional do CIISA, 16-17 novembro, 2018. Página 43 do livro de resumos.

Pereira G, Silva M F, Carneiro C, Duarte A, Mateus L, Lopes-da-Costa L, Silva E. A putative new Campylobacter species potentially associated with Bovine Genital Campilobacteriosis. Comunicação em painel e oral apresentada no Congresso Internacional do CIISA, 16-17 novembro, 2018. Página 42 do livro de resumos.

Outras comunicações científicas

Silva M F. Apresentação oral “Avaliação de métodos de diagnóstico molecular para deteção de Campylobacter fetus subsp. venerealis em amostras prepuciais bovinas”. Apresentação para investigadores do CIISA, 22 de janeiro, 2020. Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade de Lisboa.

Silva M F. Apresentação oral “Caracterização genómica e fenotípica de isolados clínicos de Campylobacter fetus subsp. venerealis”. Apresentação para investigadores do CIISA, 26 de janeiro, 2021. Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade de Lisboa.

 

Agradecimentos / Colaborações

  • Associação de Defesa Sanitária de Estremoz
  • Associação de Defesa Sanitária de Monforte
  • Starcross Veterinary Investigation Centre from Animal and Plant Health Agency (APHA), United Kingdom
  • Andrew Hemphill; Institute of Parasitology, Vetsuisse Faculty, University of Bern, Berne, Switzerland
  • Sabine Kienesberger; Institute of Molecular Biosciences, University of Graz, Graz, Austria; BioTechMed-Graz, Austria; Field of Excellence BioHealth, University of Graz, Graz, Austria
  • CIISA- Centro Interdisciplinar em Sanidade Animal, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade de Lisboa (projetos UID/CVT/00276/2013 & UID/CVT/00276/2019 e UIDB/00276/2020)
  • AL4AnimalS – Associate Laboratory for Animal and Veterinary Science (LA/P/0059/2020)
  • Fundação para a Ciência e a Tecnologia
  • FEDER- Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional